光學類檢測器的主要技術指標以及檢測結果-華普通用
檢測系統
檢測器種類很多也非常重要,但是使用最多的是光學類檢測器,占比約75%左右,這里重點光學類檢測器。
1)光學類檢測器基本功能:提供準確的波長、提供足夠小的檢測限(靈敏度,這是用戶最關心的問題之一)、提供小的噪聲、飄移和重復性,給出最終檢測結果。
2)最常用HPLC檢測器的類型
在國內外的科技界,很多色譜工作者認為高壓泵和色譜柱是HPLC的核心,檢測器只是一種光譜儀器,沒有分離就不成為色譜。所以,通常認為高壓泵和色譜柱最重要。而光譜工作者認為光譜儀器是HPLC的核心,沒有它,分析檢測結果什么也不知道,高壓泵只是輸液、色譜柱只是分離,關鍵要靠檢測器檢測才有測試結果,所以檢測器最重要。作者認為上述兩種說法都不完全正確,應該說HPLC系統中每個部分都重要,千萬不能偏看哪個部分,否則將得不到可靠的分析檢測數據。
目前,國內外科技工作者最常用的檢測器有以下幾種:蒸發光檢測器、分子熒光檢測器、示差折光檢測器、各類紫外可見光譜檢測器、各類質譜檢測器、各類AAS(原子吸收光譜)檢測器、各類原子熒光檢測器等等。在各類聯用技術中,凡與HPLC的泵、柱聯用的儀器,都可以稱之為檢測器。
3)光學類檢測器的主要技術指標:
光學類檢測器是所有檢測器中使用最多的一種,它的主要技術指標如下:
(1)波長范圍:長波和短波兩端決定儀器的適用范圍,限制或決定儀器的適用性。例如:一般只有氘燈的紫外檢測器,就不能測試吸收峰在618nm的強致癌物質孔雀石綠,以及吸收峰在200nm的紫外吸收物質,因為氘燈沒有618nm這根譜線,而在200nm時能量弱、信噪比差。
(2)波長準確度:影響摩爾吸光系數、影響儀器的靈敏度,比較儀器時很重要。
(3)波長重復性:影響分析數據的重復性。
(4)光譜帶寬:大家不大注意,它是分析誤差來源之一,一般采用譜線輪轂法測試。
(5)噪聲:非常重要,一般光譜儀器有多大的噪聲,就可能在測試結果中增加多大的誤差。
有些儀器采用軟件平滑噪聲,作者認為不是好辦法。因為平滑時一是信號也損失了一部分,二是硬件的噪聲并沒有去掉。測試結果表面上噪聲小了,其實信噪比沒有變化。所以,作者認為應該從算法上著手,采用目前國際上一種最先進的利用軟件、算法降噪技術,這種技術只降噪聲,不影響信號,這是光譜儀器研發工作者應該重視的問題。
(6)穩定性(含漂移、重復性):它直接限制光譜儀器的可靠性。
(7)光度范圍:應該注意多少濃度范圍內能給出準確數據。
(8)量程:應重視最靈敏量程,不能用最大量程測試儀器的靈敏度(后面將有論述)。
4) 幾種特別值得重視的HPLC檢測器
(1)最常用的:紫外檢測器(UVD)(占70%左右)、熒光檢測器(FLD)(占10%) 、視差折光檢測器(RID )(占3%)、其他檢測器(如質譜等等,占17%)。
(2)還有目前使用非常多的、質量型檢測器:蒸發光散射檢測器--ELSD, (已上藥典,可以替代RID)。
(3)用戶目前特別關注的新型檢測器:質譜檢測器、化學發光檢測器、放射性檢測器、光電導檢測器、旋光檢測器、電噴霧檢測器(最新的質量檢測器,后面還將詳細討論)等等。